Perpustakaan Digital ITB

Isolasi dan karakterisasi enzim selulase dari Volvariella volvacea yang biasa hidup di media yang kaya akan selulosa telah berhasil dilakukan. Selulase adalah enzim kompleks yang mengandung endo-B glukanase (Cx), ekso-B glukanase (C1) dan selobiase. Enzim Cx adalah enzim yang mempunyai kemampuan untuk menghidrolisis senyawa selulosa yang larut (yang telah diolah secara kimia), sedangkan enzim C1 adalah enzim yang dapat menghidrolis senyawa selulosa yang tidak larut. Kemampuan selulase untuk menghidrolisis senyawa selulosa tergantung pada substrat yang digunakan. Senyawa selulosa yang larut mudah dihidrolisis, tetapi senyawa selulosa yang tidak larut mempunyai struktur kristal yang teratur, lama dan sukar dihidrolisisnya. Substrat yang digunakan untuk pengujian aktivitas enzim, yaitu karboksimetilselulosa (CMC), kertas saring dan kapas. Ekstrak enzim bebas sel diperoleh dengan penyaringan menggunakan gelas masir yang dihisap dengan pompa vakum dan disentrifuga pada temperatur 2-4oC. Kadar protein ditentukan dengan metode Lowry dan aktivitas enzim ditentukan dengan metode Mandels. Enzim dimurnikan secara pengendapan dengan garam amonium sulfat, dilanjutkan dengan menggunakan polietilenglikol. Karakterisasi enzim yang dilakukan meliputi: pH, temperatur, waktu inkubasi, konsentrasi substat, nilai Km dan pengaruh inhibitor terhadap substrat CMC. Hasil penelitian menunjukkan bahwa enzim selulase ekstraselular mengandung gugus-SH. Keabsahan data diuji dengan penambahan aktivator sistein dan inhibitor parahidroksimerkuribenzoat (PHMB) dan merkuriklorida (HgCl2).