Perpustakaan Digital ITB

Indonesia merupakan negara kepulauan sehingga memiliki sumber daya perikanan yang berlimpah, salah satunya adalah kelompok krustasea seperti udang dan kepiting. Berdasarkan data statistik Kementrian Kelautan dan Perikanan RI, produksi udang di Indonesia mencapai 645.000 ton/tahun beserta limbahnya sebanyak 56.200 ton/tahun. Limbah berupa kulit udang terdiri dari polimer kitin sebesar 17–20%. Kitosan (turunan dari deasetilasi kitin) dapat dimanfaatkan menjadi material bernilai ekonomi tinggi dalam industri. Hidrolisis ikatan β-1,4-glikosidik pada kitosan menggunakan kitosanase (EC 3.2.1.132) menghasilkan kitooligosakarida. Senyawa ini memiliki banyak keunggulan dalam bidang industri contohnya bersifat larut dalam air dan memiliki berbagai bioaktivitas, diantaranya antibakteri, antijamur, antiinflamasi, dan antidiabetes. Penelitian ini ditujukan untuk memproduksi, memurnikan kitosanase rekombinan (rek-Csn) dari bakteri laut Bacillus amyloliquefaciens ABBD pada Escherichia coli BL21 (DE3), dan menganalisis produk hidrolisis kitosan oleh rek-Csn. Sel yang mengandung rek-Csn ditumbuhkan pada media Lysogeny Broth dengan penambahan isopropil β-D-1- tiogalaktopianosida IPTG setelah sel mencapai derajat kekeruhan (OD600) sebesar 0,6–0,8. Kultul sel kemudian diinkubasi pada 37 °C selama 4 jam. Pelet sel kemudian dilisis dan supernatan dimurnikan dengan kromatografi penukar kation (CM TOYOPEARL). Analisis Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE) menunjukkan bahwa protein rek-Csn yang dihasilkan telah murni dan memiliki massa molekul ~27 kDa. Protein rek-Csn memiliki aktivitas spesifik terhadap larutan kitosan sebesar 1594,86 U/mg pada pH 6 dan suhu 50 °C. Produk hidrolisis kitosan oleh rek-Csn menghasilkan kitooligosakarida yang memiliki bioaktivitas antibakteri.