Perpustakaan Digital ITB

G Protein-Coupled Receptors (GPCR) merupakan target penting dalam pengembangan obat, dengan ?-arrestin-1 yang berperan dalam modulasi pensinyalan kelas reseptor ini dan memiliki potensi terapeutik. Penelitian ini bertujuan untuk mengkonstruksi dua plasmid biosensor berbasis komplementasi Nanolucifease untuk mendeteksi interaksi antara ?2-Adrenoceptor (?2AR) dan ?-arrestin-1. Konstruksi plasmid yang didesain pada penelitian ini meliputi ?2AR yang dilabel dengan SmBiT, dan ?-arrestin-1 yang dilabel dengan LgBiT. Subkloning dilakukan menggunakan PCR-based cloning dari plasmid template. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ?-arrestin-1 berhasil diamplifikasi dan diberi situs restriksi EcoRI dan XbaI, sementara SmBiT tidak berhasil diamplifikasi. Ligasi pada rasio insert-vektor 3:1 dan 5:1 menghasilkan koloni Escherichia coli (E. coli) yang tumbuh pada media penambahan antibiotik yang sesuai, tetapi PCR koloni tidak berhasil memverifikasi keberadaan hasil ligasi pada DNA ?-arrestin-1 dan LgBiT. Hasil ini mengindikasikan bahwa konstruksi kedua plasmid biosensor belum berhasil dilakukan dan memerlukan optimasi lebih lanjut.