Perpustakaan Digital ITB

Sel AD293 adalah satu sel inang mamalia untuk produksi vaksin berbasis adenovirus. Produksi adenovirus sebagai vektor untuk vaksin dapat terganggu oleh ekspresi gen pengkode protein vaksin. Sistem Lac merupakan salah satu sistem regulasi transkripsi yang dapat digunakan untuk inhibisi ekspresi protein pada sel inang untuk meningkatkan produksi adenovirus. Penelitian ini bertujuan mengonstruksi sel AD293-lacI yang stabil untuk produksi vaksin berbasis vektor adenovirus dengan sistem regulasi operon lac. Sel AD293-lacI dikonstruksi dengan cara menginfeksikan lentivirus yang membawa gen pengkode protein lacI pada sel AD293. Sel hasil infeksi diseleksi dengan media puromisin 1 ????g/mL selama 12 hari. Sel hasil seleksi berhasil tumbuh dan diperbanyak, sementara kontrol negatif tereliminasi di media seleksi. Sel AD293-lacI yang berhasil dikonstruksi digunakan untuk produksi adenovirus AdV_Spike dan AdV_LacO_Spike, mengunakan sel AD293 dan AD293-lacI (transient) sebagai pembanding. Titer adenovirus AdV_Spike dan AdV_LacO_Spike pada sel AD293 adalah 8,9 × 10 7 dan 7,3× 10 7 IFU/mL. Titer adenovirus AdV_Spike dan AdV_LacO_Spike pada sel AD293-lacI adalah 1,3 × 10 7 dan 1,2 × 10 7 IFU/mL, sementara pada sel AD293-lacI (transient) adalah 1,2 × 10 6 dan 2,5 × 10 6 IFU/mL. Hasil deteksi ekspresi protein Spike pada sel AD293-lacI menunjukkan bahwa regulasi Sistem Lac untuk menginhibisi ekspresi protein Spike belum berjalan. Meskipun sel AD293-lacI yang dikonstruksi menggunakan vektor lentivirus berhasil ditumbuhkan dan diperbanyak di media seleksi puromisin, namun ekspresi protein lacI perlu dianalisa lebih lanjut.