digilib@itb.ac.id +62 812 2508 8800

Abstrak : Telah diamplifikasi DNA pengkode protein chaperonin 60.1 Mycobacterium tuberculosis menggunakan metode reaksi polimerasi berantai (Polymerase Chain Reaction, PCR) dengan kromosom M. tuberculosis sebagai cetakan. Produk PCR berukuran 1643 pasangan basa (pb), diligasikan ke plasmid pGEM-T rekombinan dan hasil ligasi ditransformasi ke Escherichia coli JM 109 untuk menghasilkan pGEM-T rekombinan yang membawa DNA pengkode chaperonin 60.1. Analisis migrasi dan pemotongan plasmid menggunakan enzim restriksi BamHI dan EcoRI telah dilakukan terhadap pGEM-T rekombinan. Hasil menunjukkan bahwa pGEM-T rekombinan bergerak lebih lambat dibandingkan dengan pGEM-T tanpa DNA sisipan. Pemotongan tunggal pGEM-T rekombinan dengan BamHI atau EcoRI menghasilkan dua pola pemotongan yaitu plasmid berukuran 3503 pb dan plasmid tidak terpotong oleh kedua enzim restriksi. Plasmid dengan pola pertama adalah bukan plasmid membawa DNA pengkode chaperonin 60.1 dan plasmid yang tidak terpotong oleh BamHI atau EcoRI kemungkinan adalah plasmid yang mengandung DNA pengkode chaperonin 60.1 dan sedang dikarakterisasi lebih lanjut.