Perpustakaan Digital ITB

Infeksi Hepatitis B disebabkan oleh virus Hepatitis B (VHB), yang merupakan anggota dari famili Hepadnaviridae. Infeksi VHB kronis dapat berkembang menjadi karsinoma hati, salah satunya akibat keberadaan protein X VHB (HBx). Beberapa mutan HBx diketahui berasosiasi dengan terjadinya karsinoma hati, contohnya HBx K130M/V131I. Di Indonesia ditemukan HBx T118N dengan frekuensi yang hampir sama dengan HBx K130M/V131I. Pada penelitian sebelumnya telah diteliti bahwa HBx T118N dan K130M/V131I menurunkan pembentukan koloni sel HepG2. Penelitian ini bertujuan untuk melihat pengaruh HBx T118N terhadap ekspresi B-cell lymphoma 2 (Bcl-2) pada sel HepG2 menggunakan metode quantitative polymerase chain reaction (qPCR). Penelitian diawali perancangan primer Bcl-2 dan hasil analisis primer secara in silico menunjukkan nilai PRaTo -3. Uji spesifisitas menunjukkan satu puncak pada kurva leleh qPCR. Pengujian efisiensi qPCR dengan primer yang dirancang menghasilkan nilai efisiensi 2,072. Plasmid yang membawa gen pengkode HBx wild type dan mutan diisolasi dan dikonfirmasi kebenarannya menggunakan analisis migrasi, restriksi, dan penentuan urutan nukleotida. Sel HepG2 ditransfeksi dengan plasmid tersebut selama 48 jam dan diisolasi RNA totalnya. RNA total ditranskripsi balik menjadi cDNA yang digunakan sebagai cetakan qPCR. Perubahan ekspresi Bcl-2 ditentukan menggunakan metode kuantifikasi relatif Pfaffl. Keberadaan HBx T118N menurunkan ekspresi Bcl-2 dan perubahannya sejalan dengan penurunan ekspresi Bcl-2 akibat HBx K130M/V131I. Kata Kunci: Bcl-2, HBx T118N, karsinoma hati, qPCR, virus Hepatitis B