Perpustakaan Digital ITB

Lipase merupakan enzim hidrolase yang mengkatalisis hidrolisis ikatan ester pada trigliserida menjadi asam lemak bebas dan gliserol melalui pembentukan diasilgliserol dan monoasilgliserol sebagai senyawa antara. Bakteri penghasil lipase banyak ditemukan pada lingkungan yang kaya akan substrat lipid, salah satunya kompos yang mengandung berbagai bahan organik sebagai sumber nutrien bagi pertumbuhan mikroorganisme. Pada penelitian ini, dilakukan isolasi bakteri yang berasal dari kompos yang telah diperkaya dengan mikroalga Euglena gracilis. Penambahan mikroalga pada kompos dilakukan untuk menstimulasi pertumbuhan bakteri penghasil lipase sekaligus menjadi sumber substrat tambahan. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi bakteri penghasil lipase, mengkarakterisasi lipase yang dihasilkan, serta mengidentifikasi keberadaan gen pengkode lipase dari bakteri pada kompos yang diperkaya Euglena gracilis. Isolasi bakteri dilakukan hingga diperoleh isolat murni, kemudian dilakukan skrining aktivitas lipase menggunakan medium olive oil agar, Tween 80 agar, dan virgin coconut oil agar. Isolat yang menunjukkan aktivitas lipolitik pada ketiga medium dikarakterisasi berdasarkan aktivitas enzim lipase ekstraseluler dan intraseluler menggunakan substrat pNPP. Isolat terpilih selanjutnya diidentifikasi melalui sekuensing gen 16S rRNA, sedangkan gen kandidat lipase dianalisis menggunakan pendekatan genome mining berdasarkan data genom yang tersedia. Berdasarkan hasil penelitian, hanya satu isolat menunjukkan aktivitas lipolitik pada ketiga medium selektif. Isolat terkait juga menunjukkan aktivitas lipase baik secara ekstraseluler maupun intraseluler. Aktivitas lipase tertinggi diamati pada ekstraseluler yang dikonsentratkan dengan aseton (maksimum 282,8 ?M pNP) dan intraseluler yang dilisis secara kimiawi (maksimum 145,1 ?M pNP), sedangkan perlakuan lain menunjukkan aktivitas lebih rendah. Hasil analisis sekuensing 16s rRNA berhasil mengidentifikasi isolat tersebut sebagai Klabsiella michiganensis. Genome mining mengungkap keberadaan empat gen yang mengode enzim terkait hidrolisis lipid, yakni Phospholipase A1, Thioesterase 1/protease 1/lysophospholipase L1, Carboxylic ester hydrolase, dan Esterase frsA yang menunjukkan potensi lipolitik strain tersebut