Katalase merupakan salah satu enzim antioksidan dengan perannya mengkatalisis reaksi reduksi
senyawa hidrogen peroksida menjadi oksigen dan air. Katalase hidroperoksidase II (HPII) termasuk
salah satu katalase monofungsional yang tidak memiliki aktivitas peroksidase. Penelitian ini
bertujuan untuk melakukan karakterisasi hasil proses overproduksi enzim katalase HPII rekombinan
pada Escherichia coli BL21(DE3) berdasarkan prosedur hasil penelitian di Laboratorium Bioteknologi
Farmasi Sekolah Farmasi ITB, serta melakukan purifikasi protein tersebut. Bakteri E. coli BL21(DE3)
sebelumnya telah disisipkan plasmid yang membawa gen katalase HPII dan dilakukan overproduksi
dengan ko-ekspresi sistem chaperone pG-Tf2 untuk meningkatkan kelarutan protein. Karakter dari
sistem overproduksi dilihat melalui jumlah pelet sel, jumlah protein total, dan jumlah katalase HPII
yang dihasilkan. Pemurnian dilakukan dengan kromotografi afinitas Ni-NTA dan presipitasi amonium
sulfat pada rentang saturasi 30-70%. Aktivitas katalase dianalisa dengan uji gelembung dan uji
kolorimetri. Sistem overproduksi menghasilkan katalase HPII terlarut, berat pelet sel, dan protein
total berturut-turut adalah 0,27 - 2,51 mg; 1,1 – 1,89 g; dan 24,8 – 56,1 mg/mL. Sedangkan dengan
dilakukannya ko-ekspresi chaperone pG-Tf2 katalase terlarut, berat pelet sel, dan protein total
berturut-turut adalah 1,75 - 7,35 mg; 1,35 – 1,43 g; dan 35,5 – 96,6 mg/mL. Kolom afinitas Ni-NTA
tidak dapat memurnikan katalase HPII pada penelitian ini. Presipitasi amonium sulfat berhasil
mengurangi protein lain walau belum sempurna (partially purified). Aktivitas katalase terbesar
ditemukan pada saturasi amonium sulfat 50% untuk overproduksi tanpa ko-ekspresi chaperone dan
pada saturasi 40% pada overproduksi ko-ekspresi chaperone. Sistem ko-ekspresi chaperone didapati
mengurangi aktivitas katalase HPII.