Perpustakaan Digital ITB

Lipase (EC 3.1.1.3) adalah enzim hidrolase yang banyak digunakan dalam proses industri, termasuk produksi biodiesel. Proses utama dalam sintesis biodiesel adalah reaksi transesterifikasi, mengubah trigliserida menjadi metil ester dengan adanya metanol dengan bantuan katalis. Katalis yang tahan terhadap pelarut dan stabil secara termal sangat penting sebagai biokatalis dalam industri. Salah satu katalis adalah lipase termostabil. Lipase kompos 1 (Lk1) adalah lipase termostabil yang diisolasi dari Pseudomonas stutzeri. Gen LK1 disisipkan ke dalam vektor ekspresi pET30a (+) dan ditransformasikan ke dalam sel inang Escherichia coli. Penelitian sebelumnya menunjukkan aktivitas yang rendah dengan menggunakan konsentrasi SDS yang tinggi (10%). Namun, penggunaan SDS pada konsentrasi di atas kemungkinan besar menyebabkan denaturasi enzim. Oleh karena itu, penelitian ini mengoptimasi lisis sel dengan berbagai konsentrasi SDS untuk mendapatkan protein Lk1 yang dapat larut. Selain itu, Lk1 juga dikarakterisasi untuk mendapatkan informasi mengenai aktivitasnya dalam reaksi transesterifikasi sebagai biokatalis. Hasil penelitian menunjukkan aktivitas optimum pada konsentrasi 0,25% SDS. Protein yang dimurnikan menggunakan kromatografi afinitas Ni-NTA meningkatkan aktivitas spesifik Lk1 hingga empat kali lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak kasar. Analisis lebih lanjut menunjukkan bahwa protein enzim lebih menyukai metil palmitat (C16) sebagai substrat pada suhu 60°C. Aktivitas enzim meningkat dengan adanya n-heksana. Hasil ini dikonfirmasi oleh studi in silico. Enzim ini juga menunjukkan aktivitas transesterifikasi menggunakan minyak goreng. Hasil ini menunjukkan bahwa Lk1 memiliki potensi sebagai biokatalis dalam sintesis biodiesel.