Rosuvastatin merupakan salah satu obat untuk mengatasi hiperkolesterolemia. Rosuvastatin beredar dalam bentuk tablet, namun karena rute oral memiliki kelemahan diformulasikanlah bentuk Lipid nanopartikel Rosuvastatin yang dapat menjadi inovasi baru dengan menggunakan formula yang telah dioptimasi pada penelitian sebelumnya. Terdapat efek samping dari penggunaan rosuvastatin pada proses spermatogenesis. Penelitian ini bertujuan untuk mengkarakterisasi LNP-Rosuvastatin (LNP-R) dan LNP Kosong (LNP) serta menganalisis pengaruh LNP-R serta LNP terhadap ekspresi gen Ube2b yang merupakan salah satu gen yang berperan pada proses spermatogenesis. Penelitian diawali dengan preparasi LNP dan LNP-R dilanjutkan dengan pengujian viabilitas pada sel TM4 untuk mengetahui dosis yang mematikan untuk setengah populasi (IC50). Selanjutnya analisis ekspresi gen Ube2b dilakukan, diawali dengan analisis kualitas primer yang terdiri dari uji pendahuluan, uji spesifisitas, dan uji efisiensi primer. Analisis ekspresi gen dilakukan untuk menentukan pengaruh LNP dan LNP-R dalam tiga seri konsentrasi yaitu 0,25; 7,5; dan 15 ppm dengan metode qPCR pada gen Ube2b. Hasil karakterisasi LNP yaitu ukuran partikel, PDI, dan zeta potensial secara berturut yaitu 108 nm; 0,314; -35,50 mV dan hasil karakterisasi pada LNP-R secara berturut yaitu 91,933 nm; 0,346; -33,74 mV dengan efisiensi penjeratan 89,323%. Uji viabilitas sel mendapatkan hasil IC50 LNP-R yaitu 25,53 ppm. Hasil uji pendahuluan menunjukkan primer gen target Ube2b dan primer gen acuan Gapdh optimal pada suhu annealing 65°C. Dari hasil analisis ekspresi gen Ube2b didapatkan bahwa pemberian LNP meningkatkan ekspresi gen Ube2b dan pemberian LNP-R menurunkan ekspresi gen Ube2b jika dibandingkan terhadap masing-masing blanko. Dapat disimpulkan pemberian LNP-R memberikan inhibisi minor terhadap ekspresi gen Ube2b.