Perpustakaan Digital ITB

Promoter MeEF1A6 merupakan salah satu promoter yang berhasil diisolasi dari famili gen eEF1A tanaman singkong (Manihot esculenta Crantz cv. Adira). Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa hasil transformasi transien promoter MeEF1A6 yang dimediasi oleh Agrobacterium tumefaciens strain GV3101, dapat mengendalikan ekspresi gen pelapor uidA yang mengkode enzim ?-glukuronidase (GUS) di seluruh bagian kecambah tembakau, organ daun, batang, dan akar tanaman jagung, serta tomat. Namun, uji aktivitas promoter MeEF1A6 dalam meregulasi ekspresi gen pelapor uidA pada tanaman putatif transgenik belum pernah dilakukan. Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan untuk menguji aktivitas promoter MeEF1A6 dalam meregulasi ekspresi gen pelapor uidA pada tanaman putatif transgenik hasil transformasi. Teknik transformasi pada tanaman model Nicotiana tabacum L. menggunakan pengembangan dari metode leaf disc transformation dengan perantara A. tumefaciens strain GV3101 yang mengandung vektor biner pBI121-MeEF1A6, pBI121-CaMV35S (kontrol positif), dan A. tumefaciens tanpa vektor biner (kontrol negatif). Efisiensi transformasi yang diperoleh dari hasil transformasi promoter MeEF1A6 sebesar 8,78% dan 5,6% untuk kontrol positif (CaMV35S). Uji aktivitas promoter dilakukan secara kualitatif dengan metode histokimia GUS. Pengamatan lokalisasi ekspresi gen uidA terhadap jaringan tanaman putatif transgenik dilakukan dengan menggunakan mikroskop cahaya. Hasil sayatan organ akar menunjukkan bahwa promoter MeEF1A6 memiliki aktivitas pada bagian korteks, epidermis, dan rambut akar. Promoter MeEF1A6 juga dapat aktif pada jaringan korteks, xilem, dan empulur batang, serta seluruh jaringan daun. Pada permukaan daun, ekspresi GUS secara konsisten terlihat lebih kuat pada daerah stomata dan urat daun. Berdasarkan hasil penelitian ini dapat disimpulkan adanya aktivitas promoter MeEF1A6 dalam meregulasi ekspresi gen pelapor uidA pada akar, batang, dan daun tanaman tembakau putatif transgenik.