Perpustakaan Digital ITB

Promoter merupakan sekuens DNA yang berperan dalam mengatur ekspresi gen. Promoter gen MeEF1?3 adalah anggota promoter famili gen EF1? yang berhasil diisolasi dari singkong (Manihot esculenta Crantz.). Penelitian sebelumnya menginformasikan bahwa promoter ini mampu mengendalikan gen pelapor GUS secara transien pada akar, batang, daun, buah tanaman jagung dan tomat, buah pisang mas, serta jaringan kecambah tembakau. Namun ekspresi serupa tidak ditemukan pada akar kecambah tembakau. Hal ini mengindikasikan bahwa promoter ini diekspresikan secara spesifik pada jaringan tertentu. Promoter MeEF1?3 merupakan promoter yang relatif baru dan belum pernah dikarakterisasi secara stabil. Oleh karena itu perlu dilakukan analisis ekspresi secara stabil untuk mengevaluasi pola ekspresi yang dihasilkan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi aktivitas promoter gen MeEF1?3 pada berbagai organ tanaman tembakau (Nicotiana tabacum Linn.) hasil transformasi dengan mediasi Agrobacterium tumefaciens GV3101. Konstruksi promoter gen MeEF1?3 yang meregulasi gen pelapor GUS dalam vektor biner pBI121 diintroduksikan ke eksplan tembakau kemudian ditumbuhkan secara in vitro. Hasil penelitian ini menunjukkan konsentrasi kanamycin minimal untuk media seleksi antibiotik adalah 100 mgL-1. Analisis histokimia pada planlet tembakau putatif transgenik menunjukkan bahwa jika dibandingkan dengan kontrol negatif (tanpa vektor biner), promoter MeEF1?3 dapat mengendalikan ekspresi gen GUS di organ batang dan daun (khususnya tulang daun) tapi tidak pada organ akar. Sayatan pada organ batang dan daun mengindikasikan bahwa gen GUS hanya diekspresikan secara spesifik pada sel-sel floem, meskipun secara kualitatif ekspresinya lebih rendah dibandingkan ekspresi gen GUS dibawah kontrol promoter CaMV35S (kontrol positif). Efisiensi transformasi dari metode yang digunakan pada penelitian ini mencapai 11,3%±4,2.