digilib@itb.ac.id +62 812 2508 8800

PENGEMBANGAN KULTUR AKAR RAMBUT Rauwolfia serpentina (L.) BENTH. UNTUK PRODUKSI IN VITRO RESERPIN

Penulis : Helda Lasboda Hader S P [20612024]
Kontributor / Dosen Pembimbing :
  • Dr. Erly Marwani, MS
Jenis Koleksi : Tesis
Penerbit : Biologi
Fakultas : Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati
Subjek : Life sciences ; biology
Kata Kunci : Rauwolfia serpentina, Agrobacterium rhizogenes, akar rambut, reserpin.
Sumber :
Staf Input/Edit : agus slamet  
File : 1 file
Tanggal Input : 08 Mar 2019

Pule pandak (Rauwolfia serpentina L. Benth.) dilaporkan mengandung alkaloid reserpin. Salah satu sumber alternatif untuk menyediakan sumber alkaloid adalah melalui kultur akar rambut. Penelitian ini bertujuan untuk menginduksi akar rambut dengan cara mentransformasi jaringan Rauwolfia serpentina oleh Agrobacterium rhizogenes strain ATCC 15834, mengkonfirmasi keberadaan gen rolA dan rolC pada akar rambut hasil transformasi, mengoptimasi dan menentukan konsentrasi Indole Butyric Acid (IBA) untuk pertumbuhan akar rambut dan akumulasi reserpin yang paling optimum. Induksi Akar rambut dilakukan dengan mentransformasi potongan daun R. serpentina oleh bakteri A. rhizogenes ATCC 15834. Induksi dilakukan pada medium MS (Murashige & Skoog) padat dengan penambahan 100 ?M asetosiringon. Pertumbuhan akar rambut hasil transformasi tersebut dioptimasi pada medium ½ MS cair dengan penambahan IBA masing-masing sebesar 0,01?M; 0,1?M dan 1,0 ?M dan tanpa penambahan IBA sebagai kontrol. Analisis kadar reserpin dilakukan pada KCKT dengan kolom C18 bondapak, detektor UV ? 268 nm, fase gerak asetonitril:KH2PO4 (2:8), dan laju alir 1 mL/menit. Hasil transformasi menunjukkan bahwa akar dapat diinduksi dari potongan daun dengan persentase keberhasilan sebesar 52,73 %. Pertumbuhan akar rambut menunjukkan bahwa hasil tertinggi diperoleh pada medium dengan penambahan IBA sebesar 0,01 ?M pada minggu ke-2 yaitu sebesar 0,12 ± 0,003 g, diikuti oleh perlakuan penambahan IBA 0,1 ?M (0,112 ± 0,003 g), penambahan IBA 1,0 ?M (0,109 ± 0,005 g), dan tanpa IBA (0,105 ± 0,006 g). Hasil analisis HPLC menunjukkan kadar reserpin tertinggi diperoleh pada perlakuan penambahan IBA 1,0 ?M saat minggu ke- 4 yaitu sebesar 557,6 ± 27,4 mg/g Berat Kering, diikuti oleh perlakuan penambahan IBA 0,1 ?M pada minggu ke- 5 (420,2 ± 62,6 mg/gBK), tanpa penambahan IBA pada minggu ke-4 (222,9 ± 12,9 mg/gBK) dan penambahan IBA 0,01 ?M pada minggu ke-4 (105,55 ± 7,87 mg/g BK). Hasil analisis PCR menunjukkan adanya fragmen berukuran 248 bp dan 490 bp yang bersesuaian dengan gen rolA dan rolC. Berdasarkan hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa Jaringan R. serpentina berhasil ditransformasi dengan perantara A. rhizogenes ATCC 15834 yang membawa rolA dan rolC dan menghasilkan akar rambut.

Artikel Terkait