Perpustakaan Digital ITB

Jaringan rawan bersifat avascular sehingga apabila jaringan kerusakan sulit diatasi karena kemampuan regenerasi jaringan rawan rendah. Salah satu cara untuk mengatasi kerusakan jaringan rawan adalah dengan rekayasa jaringan. Rekayasa jaringan menggabungkan sel, biomaterial scaffold dan regulatory signals untuk meregenerasi jaringan rawan. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari penetrasi sel di dalam scaffold silk fibroin ukuran pori 500 ?m, mengevaluasi peran LAA (L-ascorbic acid 2 phosphate) 50 ?g/mL dan PRP (Platelet Rich Plasma) 10% terhadap ekspresi gen N-cadherin, gen ?-catenin, gen cyclin D dan gen kolagen tipe 2 serta proteinnya sebagai penanda diferensiasi hADSC (human adipose-derived stem cell) menjadi kondrosit. Sel punca mesenkimal diisolasi dari jaringan lemak kemudian ditumbuhkan di dalam medium kultur. hADSC dikonfirmasi penanda sel punca mesenkimal (CD 105+, CD 73+, dan CD45-) dengan analisa FACS dan diuji sifat multipotensinya dengan pewarnaan Alizarin Red, Oil Red O dan Alcian Blue. Sel yang telah terkonfirmasi ditumbuhkan pada scaffold 3D silk fibroin dengan medium LAA 50 ?g/mL and PRP 10% selama 21 hari. Penetrasi hADSC pada scaffold silk fibroin dan keberadaan kolagen tipe 2 dianalis dengan immunohistokimia. Ekspresi gen N-cadherin, ?-catenin dan cyclin D dianalisa dengan RT-qPCR. Hasil karakterisasi sel dari adipose menunjukkan bahwa sel memiliki sifat sel punca mesenkimal yang selanjutnya disebut hADSC. hADSC mampu penetrasi ke dalam scaffold silk fibroin. Ekspresi gen N-cadherin sebagai penanda interaksi antar sel mengalami peningkatan pada hari ke-21 pada kultur yang induksi PRP dan LAA yang menandakan terjadinya kondensasi sebagai awal kondrogenesis. PRP dan LAA meningkatkan ekspresi gen ?-catenin dan cyclin D pada hari ke-7 dan terjadi penurunan pada hari-21. Analisis immunohistokimia menunjukkan bahwa pada hari ke 21 telah terbentuk kolagen tipe 2 pada hADSC yang diinduksi PRP dan LAA. Berdasarkan hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa terjadi penetrasi sel ke dalam scaffold silk fibroin ukuran pori 500 ?m, PRP dan LAA mendukung proses awal kondensasi, menginduksi proliferasi awal dengan menekan ekspresi cyclin D sebagai gen yang berperan dalam proliferasi yang diregulasi signaling Wnt/? catenin, mendukung diferensiasi dengan peningkatan produksi kolagen tipe 2.