Perpustakaan Digital ITB

Metotreksat (MTX) dosis tinggi merupakan komponen penting dalam kemoterapi berbagai keganasan, namun penggunaannya dibatasi oleh jendela terapi yang sempit dan risiko toksisitas parah. Pemantauan Kadar Obat dalam Darah (PKOD) menjadi krusial untuk memandu terapi penyelamatan dan memastikan keamanan pasien. Oleh karena itu, diperlukan metode analisis yang andal untuk kuantifikasi MTX dalam matriks biologis. Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan dan memvalidasi metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) untuk penetapan kadar metotreksat dalam plasma darah manusia guna mendukung pelaksanaan PKOD yang efektif dan aman. Analisis dilakukan menggunakan sistem KCKT dengan detektor UV pada panjang gelombang 304 nm. Pemisahan kromatografi dicapai menggunakan kolom Enduro C18G (250 mm×4,6 mm, 5 ?m) dengan fase gerak yang terdiri dari campuran dapar fosfat 10 mM dan pelarut organik (metanol:asetonitril, 2:1 v/v) pada perbandingan 81:19 (v/v) secara isokratik. Sampel plasma dipreparasi menggunakan metode presipitasi protein dengan metanol. Validasi metode mencakup parameter selektivitas, linearitas, batas kuantifikasi, akurasi, presisi, rekoveri ekstraksi, efek matriks, dan stabilitas. Metode yang dikembangkan menunjukkan linearitas yang sangat baik pada rentang konsentrasi 0,044-11,00 ?M dengan koefisien determinasi (R2) 0,999. Batas kuantifikasi bawah (LLOQ) yang diperoleh adalah 0,066 ?M, yang secara klinis relevan untuk memantau klirens akhir obat di bawah ambang batas keamanan 0,1 ?M. Akurasi (% galat) dan presisi (% koefisien variasi) untuk analisis within-run dan between-run masing-masing berada di bawah 5% dan 9%. Rekoveri ekstraksi rata-rata melebihi 92% dan analit terbukti stabil pada kondisi bench-top, tiga siklus beku-cair, dan penyimpanan dalam autosampler selama 24 jam. Metode KCKT yang telah divalidasi ini terbukti selektif, akurat, presisi, dan andal untuk penetapan kadar metotreksat dalam plasma manusia. Metode ini memenuhi kriteria penerimaan berdasarkan pedoman internasional dan sesuai untuk diaplikasikan dalam layanan PKOD klinis.