![](https://digilib.itb.ac.id/assets/icon/pdf.gif)
ABSTRAK Bintang Tedjobagaskara
Terbatas  Irwan Sofiyan
» Gedung UPT Perpustakaan
Terbatas  Irwan Sofiyan
» Gedung UPT Perpustakaan
Induced Pluripotent Stem Cell (iPSC) adalah sel-sel pluripoten hasil pemrograman ulang
yang dengannya tidak diperlukan pemanenan embrionik yang menghadapi berbagai isu
bioetika. Vektor episom merupakan salah satu metode menghasilkan iPSC via
pemrograman ulang sel somatik seperti umbilical cord mesenchymal stromal cell (UCMSC)
dengan keunggulan cost-effective, mudah diperbanyak, dan bisa menghasilkan
iPSC tingkat klinis tetapi efisiensi pemrograman ulang metode ini masih tergolong
rendah. Efisiensi transfeksi dari vektor episom dapat ditingkatkan melalui optimasi
parameter elektroporasi sehingga efisiensi pemrograman ulang pun diharapkan dapat
meningkat. Penelitian ini bertujuan untuk mengamati voltase dan panjang pulsa optimal
untuk mentransfeksi UC-MSC, serta untuk mengamati reagen pendukung terbaik yang
digunakan untuk mentransfeksi sel. Penelitian dilakukan dengan mentransfeksikan UCMSC
dengan pCMV-eGFP menggunakan variasi voltase 200 V, 250 V, 300 V, 400 V,
dan 500 V disertai reagen pendukung CloneR dan P188 lalu 5 hari setelahnya sel dihitung
dan dibaca ekspresi GFP-nya. Selanjutnya dilakukan optimasi panjang pulsa dengan
rangkaian yang serupa menggunakan variasi 7.5 ms, 8 ms, 8.5 ms, 9 ms, dan 9.5 ms
dengan reagen pendukung CloneR, P188, dan Rock(Y) inhibitor. Selanjutnya UC-MSC
ditransfeksi episom pemrograman ulang menggunakan parameter yang dioptimasi dan
dibaca marka pemrograman ulangnya. Hasil yang didapatkan menunjukkan UC-MSC
yang ditransfeksi dengan voltase 200V dan reagen pendukung CloneR menghasilkan sel
viabel tertinggi dan populasi sel bermarka GFP terbanyak bersama dengan UC-MSC yang
ditransfeksi dengan panjang pulsa 8.5 ms dan reagen pendukung CloneR. Meskipun iPSC
belum berhasil terbentuk dan marka-marka pemrograman ulang tidak diekspresikan,
perubahan morfologi yang teramati mengindikasikan adanya proses pemrograman ulang
yang terjadi pada sel. Dengan demikian pada penelitian ini didapatkan voltase 200 V dan
panjang pulsa 8.5 ms menjadi parameter terbaik untuk mentransfeksi UC-MSC serta
reagen CloneR menjadi reagen pendukung terbaik.