Perpustakaan Digital ITB

Lipase LK2 dan PPD masing-masing memiliki aktivitas hidrolisis dan transesterifikasi yang baik sebagai biokatalis dalam pembuatan biodiesel. Penelitian bertujuan untuk menentukan aktivitas transesterifikasi lipase isolat lokal menggunakan pendekatan eksperimen dan biokomputasi untuk pembuatan biolubricant. Aktivitas transesterifikasi lipase diuji dengan sintesis ester pNP menggunakan substrat metil laurat pada pelarut aseton. Reaksi transesterifikasi dilakukan pada kecepatan pengocokan 120 rpm, suhu 50 °C dengan waktu 6 jam. Keberjalanan reaksi dianalisis dengan melihat perubahan konsentrasi substrat pNP dengan spektrofotometer UV-VIS pada 400 nm. Ekstrak kasar hasil lisis sonikasi-lisozim memiliki aktivitas transesterifikasi tertinggi enzim LK2 sebesar 1,578 0,013 U/mg, dibandingkan aktivitas transesterifikasi PPD sebesar 1,100 0,007 U/mg. Hasil yang sama juga terlihat pada ekstrak kasar hasil lisis pendidihan-SDS. Aktivitas transesterfikasi terhadap ekstrak kasar LK2 sebesar 1,287 0,027 U/mg, sedangkan PPD sebesar 0,936 0,001 U/mg. Sintesis bioubricant dilakukan dengan metode refluks. Hasil kromatografi lapis tipis menunjukkan lipase isolat lokal LK2 memberikan noda tipis, sedangkan PPD tidak terlihat noda. Proses protein-ligan docking dilakukan untuk melihat interaksi antara reseptor dan ligan saat terjadi reaksi katalisis menggunakan aplikasi Autodock Vina. Enzim LK2 memiliki interaksi hidrogen antara oksigen karbonil substrat dengan atom oksigen karbonil pada residu S109, yang mana interaksi yang terjadi sesuai dengan mekanisme reaksi transesterifikasi. Enzim PPD memiliki interaksi hidrogen antara atom oksigen ester pada substrat dengan atom hidrogen pada gugus imidazol residu H387 yang mana interaksi yang terjadi sesuai dengan mekanisme reaksi transesterifikasi. Studi bioinformatika menggunakan CASTp server menunjukkan bahwa LK2 memiliki luas area 543,362 Å2 dan volume kantong katalitik (catalytic pocket) 640,821 Å3, sedangkan PPD memiliki luas area 173,333 Å2 dan volume kantong katalitik (catalytic pocket) 142,587 Å3. Dengan hasil tersebut, aktivitas transesterifikasi enzim LK2 dan PPD telah terkonfirmasi secara biokomputasi.