Perpustakaan Digital ITB

Penyakit demam tifoid saat ini dapat dicegah dengan menggunakan vaksin yang berbasis polisakarida Vi yang merupakan faktor virulensi dari S.typhi. Untuk dapat memproduksi polisakarida Vi dengan rendemen yang tinggi, maka penting diketahui tentang biosintesis dari polisakarida Vi dan regulator yang terlibat. Pada kondisi in-vivo, S. typhi menghadapi berbagai osmolaritas larutan yang berbeda-beda, dan sistem dua komponen bakteri yaitu OmpR-envZ, meregulasi dengan menaikkan atau menurunkan biosintesis kapsul polisakarida Vi. Salah satu strain penghasil polisakarida Vi, S. typhi galur C6524 digunakan untuk mempelajari pengaruh osmolaritas medium terhadap biosintesis polisakarida Vi, dan pola osmoregulasi terhadap biosintesis polisakarida Vi dari S. typhi galur C6524. Metode dilakukan dengan menumbuhkan S. typhi galur C6524 pada medium dengan osmolaritas 50 mM, 100 mM, dan 150 mM dengan sistem batch. Konsentrasi polisakarida Vi diukur dengan metode ELISA. Untuk penyelidikan lebih lanjut tentang pola osmoregulasi galur C6524, salah satu gen regulator, OmpR telah diisolasi menggunakan primer spesifik gen OmpR kemudian diurutkan asam nukleotidanya. Analisis urutan nukleotida dilakukan dengan BLAST dan Lallign, analisis asam amino dilakukan dengan Prosite dan Multiple Sequence Allignment. Hasil kultivasi menunjukkan konsentrasi polisakarida Vi rata-rata untuk osmolaritas 50 mM, 100 mM, dan 150 mM berturut-turut 11,49 ?g/mL, 12,06 ?g/mL, dan 14,53 ?g/mL. Analisis statistika menggunakan Anova menyatakan perlakuan osmolaritas 150 mM signifikan mempengaruhi kadar Vi dibandingkan osmolaritas kontrol 100 mM maupun osmolaritas yang lebih rendah yaitu 50 mM. Analisa BLAST dan LAlign menunjukkan identity 100% antara galur C6524 dan Ty2. Analisa terhadap sekuen asam amino menunjukkan bahwa OmpR C6524 juga memiliki motif ?4-?5-?5 yang merupakan area penting dalam sistem aktivasi regulator saat terjadi fosforilasi oleh domain kinase. Hal ini mengindikasikan bahwa regulator respon osmolaritas S. typhi galur C6524 tidak memiliki perbedaan dengan regulator yang dimiliki oleh S. typhi galur Ty2. Respon kadar Vi yang tinggi pada perlakuan osmolaritas 150 mM memerlukan penelitian lebih lanjut untuk sistem dua komponen lain yang juga terlibat dalam biosintesis Vi, yaitu sistem RcsB-RcsC.