Perpustakaan Digital ITB

Protein eRFI dan eRF3 diperca_ya berperan dalam proses terminasi translasi pada sistem eukariot. Protein ini dikode oteh gen SAL4/SUP45 dan gen SAL3/SUP35. Secara alamiah, kedua protein diproduksi dalam jumlah relatif sedikit di Saccharomvices cerevisiae. Untuk memperoleh kedua protein dalam jumlah besar, telah dilakukan ekspresi heterolog kedua protein ini di Fscherichia coli dengan plasmid ekspresi pUKC630 dan pUKC 1803. Pemurnian kedua protein dilakukan dengan kromatografi afinitas sistem IMAC. Protein eRFI hasil pemurnian dengan sistem di atas selanjutnya digunakan dalam pemurnian antibodi anti eRF1. Untuk eRF3, pemurnian dilanjutkan dengan elektro elusi terhadap pita eRF3 pada hasil SDS PAGE. Protein eRF3 yang relatif murni kemudian digunakan sebagai antigen dalam pembuatan antibodi anti eRF3. Karakterisasi terhadap antibodi anti eRF3 dan anti eRF1 basil pemurnian telah dilakukan dengan analisis Western blot. Hasil analisis menunjukkan tinrynt kespesifikanantibodi anti eRF3 dan anti eRF I basil pemurnian relatif tinggi.