Perpustakaan Digital ITB

Abstrak : Telah dilakukan overproduksi domain ABC protein Ml Streptococcus pyogenes yang berfusi dengan intein dan domain pengikat kitin pada Escherichia coli BL21 rekombinan mengandung pCYB4emmlabc. Sebagai penginduksi digunakan isopropil ?-D-tiogalaktosida 0,4mM. Protein fusi dimurnikan secara kromatografi afinitas dengan kolom kitin dan domain pengikat kitin diputus dengan penambahan 1,4-ditiotreitol 50mM. Analisis menggunakan elektroforesis gel poliakrilamid-natrium dodesil sulfat, dot blot dan Western blot menunjukkan bahwa protein M1 fusi berukuran 94,5 kDa berhasil dioverproduksi dan domain ABC protein M1 berukuran 43 kDa berhasil dimurnikan serta keduanya dikenali oleh antibodi poliklonal mencit spesifik terhadap protein Ml. Domain ABC protein Ml murni digunakan sebagai ligan dalam penapisan 90 ekstrak aseton dan 90 ekstrak kloroform mikroba dari Indonesia berdasarkan kemampuannya untuk mengikat fibronektin manusia menggunakan metode enzyme linked immuno sorbent assay. Hasil penapisan menunjukkan bahwa tujuh ekstrak aseton (A42, A46, A47, A72, A75, A87, A90) dan 16 ekstrak kloroform (C13, C14, C15, C18, C26, C30, C36, C38, C39, C42, C45, C51, C53, C62, C63, C64) mencegah pengikatan ligan terhadap reseptor.