Perpustakaan Digital ITB
2001 TS PP MARIANA WAHYUDI 1-BAB1.pdf
File tidak tersedia
2001 TS PP MARIANA WAHYUDI 1-BAB2.pdf
File tidak tersedia
2001 TS PP MARIANA WAHYUDI 1-BAB3.pdf
File tidak tersedia
2001 TS PP MARIANA WAHYUDI 1-BAB4.pdf
File tidak tersedia
2001 TS PP MARIANA WAHYUDI 1-BAB5.pdf
File tidak tersedia
2001 TS PP MARIANA WAHYUDI 1-COVER.pdf
File tidak tersedia
2001 TS PP MARIANA WAHYUDI 1-PUSTAKA.pdf
File tidak tersedia
ABSTRAK:
Protein disulfida isomerase (PDI) merupakan multi enzim yang berfungsi mengkatalisis reaksi redoks dan reaksi isomerisasi ikatan disulfida dalam berbagai protein sekresi. Ikatan disulfida memegang peran penting untuk pelipatan protein yang benar dalam konstruksi konformasi protein natif PDI dapat ditemui pads berbagai organisme hidup dan telah diisolasi dari jamur, tumbuhan, mamalia dan sebagainya. Pada penelitian ini dilakukan isolasi dan pemurnian parsial PDI dari Sacharomyces cerevisiae (pUKC470) untuk memperoleh informasi kinetika enzim tersebut. Hasil transformasi sel Sacharomyces cerevisiae W303 dengan plasmid pUKC470 menggunakan metode litium asetat dapat meningkatkan aktivitas spesifik PDI sebesar 17 kali. Sedangkan isolasi dan pemurnian parsial PDI menggunakan metode fraksinasi amonium sulfat, diikuti dengan kolom kromatografi penukar anion DEAE-Sephacel menghasilkan PDI dengan aktivitas spesifik sebesar 255,28 unit per mg, tingkat kemurnian 137 kali terhadap cell free ex-tract, rendemen 41 %. Waktu optimum 13 menit, pH optimum 7,5 dan suhu optimum 37 derajat C. Data kinetik menunjukkan bahwa PDI terinasuk enzim alosterik yang berinteraksi secara kooperatif positif terhadap substratnya, dengan koefisien Hill (h) sebesar 3,4. Nilai Vmaks enzim sekitar 98 unit per mL dan KM apparent terhadap substrat insulin 8,0 x 10 2 mM. Basitrasin menginhibisi PDI dengan menaikkan KM terhadap substrat tetapi V,k, tetap konstan, dengan demikian PDI dapat digolongka1n sebagai enzim alosterik tipe K.