ABSTRAK Arfa Izzati
PUBLIC yana mulyana COVER Arfa Izzati
PUBLIC yana mulyana BAB 1 Arfa Izzati
PUBLIC yana mulyana BAB 2 Arfa Izzati
PUBLIC yana mulyana BAB 3 Arfa Izzati
PUBLIC yana mulyana BAB 4 Arfa Izzati
PUBLIC yana mulyana BAB 5 Arfa Izzati
PUBLIC yana mulyana BAB 6 Arfa Izzati
PUBLIC yana mulyana PUSTAKA Arfa Izzati
PUBLIC yana mulyana
Darbepoetin (DPO) merupakan hormon glikoprotein berperan dalam eritropoiesis
dengan cara menstimulasi colony forming unit eritroid (CFU-E) dan menghasilkan
eritrosit. DPO memiliki 5 N-linked chains dan 1 O-linked chain dengan total asam
sialat maksimum sebanyak 22 molekul. Penambahan 2 N-linked chains
menghasilkan peningkatan waktu paruh dan aktivitas biologi in vivo
dibandingkan dengan generasi sebelumnya. Deteksi konsentrasi DPO
menggunakan ELISA sebelumnya telah dilakukan menggunakan kit komersial
namun biaya kit komersil cukup mahal sehingga perlu dilakukan pengembangan
dan validasi metode analisis indirect-sandwich ELISA in-house untuk penentuan
kadar DPO hasil produksi sel Chinese Hamster Ovary (CHO) skala riset dan
pengembangan untuk mendapatkan metode yang lebih ekonomis. Hasil optimal
coating antibodi pada pengenceran 1:6000. Seluruh parameter validasi memenuhi
persyaratan yang berlaku dimana rentang linear 2.29-73.40 µg/mL dengan
koefisien korelasi (R)=0.9959. Akurasi yang didapatkan dalam rentang 100-
103%. Presisi intra-day dan inter-day adalah 0.46-8.44% dan 3.44-9.33%. LOD
dan LOQ berturut-turut 0.2767 µg/mL dan 0.9224 µg/mL. Analisis biaya
menunjukkan bahwa metode ELISA in-house lebih ekonomis dibandingkan
dengan kit ELISA komersial yang tersedia.