Perpustakaan Digital ITB

HMGR (3-Hidroksi-3-metilglutaril Koenzim A Reduktase) adalah salah satu enzim yang terlibat dalam biosintesis andrografolid, diterpen lakton. HMGR mengkatalisis reaksi pada jalur sintesis andrografolid, yaitu dari HMG-CoA (3-Hidroksi-3-metilglutaril Koenzim A) menjadi mevalonat. Pada penelitian sebelumnya diketahui bahwa produksi andrografolid menunjukkan kandungan yang sedikit. Pada sisi lain, beberapa penelitian mengindikasikan bahwa rekayasa kultur sel menunjukkan potensi untuk meningkatkan kandungan metabolit sekunder. Salah satu modifikasi yang dapat dilakukan adalah dengan menyisipkan gene of interest pada sel tanaman untuk meningkatkan aktivitas dari enzim spesifik yang meregulasi sintesis dari metabolit sekunder target. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mentransformasi Andrographis paniculata dengan gen hmgr1 dengan perantara Agrobacterium tumefaciens galur GV3101 yang sudah dikonstruksi dengan plasmid rekombinan pBI121, meregenerasi jaringan A. paniculata yang sudah ditransformasi, dan mengevaluasi kandungan andrografolid dengan metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) pada umur tiga bulan. Gen penanda pada A. paniculata yang digunakan untuk seleksi adalah kanamisin pada konsentrasi 20 ppm. Analisis PCR (Poly Chain Reaction) menunjukkan keberadaan fragmen berukuran 2.262 pb yang merupakan fragmen dari pBI121hmgr1. Hal ini mengkonfirmasi bahwa gen hmgr1 telah terintegrasikan ke dalam genom DNA jaringan A. paniculata. Hasil analisis kandungan andrografolid pada tanaman transforman menggunakan metode KCKT adalah 3,63% dan kandungan andrografolid pada tanaman kontrol adalah 2,94%. Hal ini menunjukkan bahwa penyisipan gen hmgr1 pada A. paniculata dapat meningkatkan kandungan andrografolid sebesar 23,5%.