digilib@itb.ac.id +62 812 2508 8800

2002_TS_PP_SUFI_1.pdf
PUBLIC Ena Sukmana

Gen carA S. typhi merupakan salah satu gen yang diduga terekspresi lebih banyak secara in vivo dan penting bagi patogenesisnya. Tingkat ekspresi gen carA S. typhi pada penelitian ini dipelajari melalui pendekatan imunologi. Peneliti sebelumnya telah berhasil memproduksi antibodi antipeptida ujung C dan ujung N protein CarA S. typhi, masing-masing dari peptida sintesis (NH3)—Lys—His—Tyr—Arg—Ser—Ser—Ala— (COOH) dan (NH3)—Ser—Ala—Leu—Leu—Val—Leu—Lys-(COOH). Tujuan penelitian pada tahap ini adalah kterisasi lebih lanjut antibodi antipeptida tersebut, dengan menekankan aspek reaksi silang antibodi. Reaksi silang antibodi antipeptida ujung C dan ujung N protein CarA S. typhi dipelajari melalui studi homologi secara in scripto dan secara eksperimen dengan menggunakan teknik I;LLSA dan Westc:n Imnrunohlotting. Hasil analisis in scripto menunjukkan adanya urutan asam amino bakteri-bakteri lain yang mempunyai homologi dan diperkirakan akan memberikan reaksi silang dengan antibodi antipeptida ujung C dan ujung N protein CarA S. typhi. Di antara bakteri-bakteri tersebut dipilih tiga bakteri yang mempunyai homologi spesifik yaitu Salmonella typhimurium, Escherichia coli, dan Pseudomonas aeruginosa. Hasil ELLSA dan Western Immunohlotting menunjukkan adanya reaksi silang antibodi antipeptida ujung C dan ujung N protein CarA S. typhi dengan S. typhimurium, E. coh dan P. aeruginosa. Tingkat reaksi silang antibodi antipeptida ujung C terhadap S. typhimunium, E. coli dan P. aeruginosa masing-masing sebesar 74,7%, 34,4% dan 186,8% sedangkan untuk antibodi antipeptida ujung N masing-masing sebesar 104,7%, 71,2%, dan 58,1%. Diharapkan antibodi antipeptida ujung C dan ujung N protein CarA S. lyphi bisa dimanfaatkan untuk mempelajari protein CarA pada organisme lainnya berdasarkan perbedaan tingkat reaksi silang yang dilakukan oleh antibodi antipeptida ujung C dan ujung N protein CarA S. typhi tersebut.