Perpustakaan Digital ITB

Abstrak: Penisilin asilase adalah enzim yang mampu menghidrolisis penisilin menjadi asam 6 amino penisilanat yang penting dalam pembuatan senyawa turunan penisilin. Untuk memperoleh ekstrak enzim, percobaan dimulai dengan menumbuhkan mikroorganismedalam media cair, dilanjutkan dengan pengerjaan fermentasi. Mikroba yang tumbuh dipisahkan dari media cairnya dengan cara sentrifuga pada suhu dingin. Untuk mengetahui apakah enzim yang dihasilkan bersifat intraselular atau ekstraselular maka pengujian aktivi tas dilakukan terhadap media cair dan terhadap sel mikroba sendiri. Supaya diperoleh hasil yang lebih teliti, pengujian aktivitas dilakukan dengan dua metoda yaitu menghitung banyaknya substrat benzil penisilin yang berkurang dan mend hitung jumlah produk 6APA yang terbentuk. Metoda pertama berdasarkan kepada pembentukan kompleks bewarna merah antesra benzil penisilin dengan hidroksilamin hidrokhlorida dan ion feri. Metoda kedua berdasarkan kepada pembentukan kom pleks bewarna kuning antara 6APA dengan para dimetilaminobenzaldehid. Kedua macam kompleks yang terbentuk itu diukur serapannya dengan spektrofotometer. Enzim penisilin asilase diperoleh dengan cara pengendapan menggunakan garam amonium. sulfat sampai kejenuhan 80 %. Hasil percobaan menunjukkan bahwa enzim penisilin asilase dari Bacillus megaterium adalah enzim ekstraselular sedangkan enzim penisilin asilase yang diproduksi dari Fusarium semitectum dan Fusarium oxysporum adalah intraselular. Dari 500 mL ekstrak enzim yang diperoleh dari Bacillus megaterium, didapatkan endapan enzim 4,0507 gram, sedangkan endapan enzim dari Fusarium semitectum dan Fusarium oxysporum sangat sedikit sekali sehingga sulit untuk dipisahkan. Dari kedua metoda pengujian aktivitas didapatkan aktivitas enzim penisilin asilase dari Bacillus megaterium 10,501 unitper mL dengan metoda pengurangan substrat benzil penisilin dan 9,978 unitper ml dengan metoda pengukuran produk 6APA. Dengan metoda pengukuran produk 6APA ini didapatkan aktivitas enzim penisilin asilase dari Fusarium semitectum.6,837 unit per mL, dan dari Fusarium oxysporum 6,315 unit per mL.