digilib@itb.ac.id +62 812 2508 8800

ABSTRAK Irfan Prabudiansyah
PUBLIC Latifa Noor

COVER Irfan Prabudiansyah
PUBLIC Latifa Noor

BAB1 Irfan Prabudiansyah
PUBLIC Latifa Noor

BAB2 Irfan Prabudiansyah
PUBLIC Latifa Noor

BAB3 Irfan Prabudiansyah
PUBLIC Latifa Noor

BAB4 Irfan Prabudiansyah
PUBLIC Latifa Noor

BAB5 Irfan Prabudiansyah
PUBLIC Latifa Noor

PUSTAKA Irfan Prabudiansyah
PUBLIC Latifa Noor

Protein Disulfida Isomerase (PDI) adalah enzim multifungsi yang mengkatalisis reaksi reduksi, oksidasi, dan isomerisasi ikatan disulfida pada protein. PDI tersusun atas dua subunit. Masing-masing subunit terdiri dari domain a, b, b', a' dan c. Domain b' dan linker x diduga berperan penting dalam pengikatan substrat. Penelitian ini bertujuan mengkarakterisasi mutan PDI ragi yang tidak mengandung domain b' dan linker x (pdi1-?b'x). Mutan pdi1-?b'x dan pdi1 diekspresikan di Escherischia coli BL21 (DE3) menghasilkan mutan pdi1-?b'x dengan berat molekul ± 45 kDa, sementara full length PDI1 mempunyai berat molekul ± 60 kDa. Mutan pdi1-?b'x masih mempunyai aktivitas mereduksi ikatan disulfida insulin sebesar 65 %. Pemurnian pdi1-?b'x menggunakan metode fraksinasi amonium sulfat, diikuti dengan kolom kromatografi penukar anion DEAE-Sephacel menghasilkan pdi1-?b'x dengan aktivitas spesifik sebesar 750,56 Unit/mg, dengan tingkat kemurnian 15 kali. Mutan pdi1-?b'x dan full length PDI1 memiliki temperatur optimum 37 °C dan pH optimum 7,5 pada temperatur 30 °C.