Perpustakaan Digital ITB

Pengikatan ACE2 dengan protein spike SARS-CoV-2 mengakibatkan akumulasi Ang-II pada plasma pasien COVID-19. Disisi lain, karboksipeptidase M32 sebagai ACE2-like enzyme dari bakteri fermentasi makanan Paenibacillus sp. B38 diketahui dapat menurunkan plasma Ang-II pada tikus uji. Studi ini bertujuan untuk mengisolasi gen ACE2-like enzyme dari isolat bakteri fermentasi makanan tradisional Indonesia dan menguji aktivitas inhibisi protein tersebut terhadap pengikatan ACE2 dengan protein S1 SARS-CoV-2. Makanan fermentasi diperoleh dari pasar tradisional kota Bandung, Jawa Barat, Indonesia. Metode isolasi bakteri dilakukan dengan media selektif MRS, kemudian dilakukan seleksi aktivitas hidrolisis sampel menggunakan substrat Nma-His-Pro-Lys(Dnp). Isolat dengan aktivitas ACE2-like enzyme diidentifikasi melalui sekuensing 16s rRNA. Rekombinan ACE2-like enzyme yang diekspresikan pada E. coli BL21(DE3) dikonfirmasi melalui sekuensing, SDS-PAGE, dan uji aktivitas hidrolisis substrat. Aktivitas inhibisi protein rekombinan terhadap pengikatan ACE2 dan S1 SARS- CoV-2 dianalisis secara in vitro dan in silico. Sebanyak tiga dari total 38 isolat bakteri yang diperoleh dari ketujuh makanan fermentasi menunjukkan aktivitas ACE2-like enzyme. Hasil sekuensing 16s rRNA menunjukkan ketiga isolat tersebut merupakan Bacillus cereus, Lactobacillus delbrueckii, dan Lactobacillus fermentum. Namun, gen karboksipeptidase M32 hanya ditemukan pada isolat B. cereus (BceCP). Rekombinan BceCP (rBceCP) telah berhasil ditransformasi pada E. coli BL21(DE3), namun terpotong sehingga menurunkan aktivitas hidrolisis substrat jika dibandingkan dengan native full length BceCP. Meskipun demikian, aktivitas inhibisi rBceCP terhadap pengikatan ACE2 dan SARS-CoV-2 tetap terdeteksi pada uji in vitro dan in silico. Berdasarkan hal tersebut, full length BceCP berpotensi sebagai “receptor mimic” ACE2 yang dapat memblokir masuknya virus ke dalam sel manusia dan diharapkan mampu menurunkan level Ang-II pada pasien COVID-19.