Teks ini menjelaskan metodologi penelitian yang akan dilakukan dari Mei 2024 hingga September 2025 di laboratorium bioproses, bioremediasi, fermentasi, dan instrumentasi terpadu SITH ITB. Penelitian ini menggunakan tiga isolat khamir (Meyerozyma carpophila M6.0.2, Candida tropicalis M.5.0.1, dan Rhodotorula mucilaginosa BI.4.1.1) yang diisolasi dari sampah plastik laut sebagai agen biodegradasi. Medium yang digunakan meliputi Wickerham's Yeast Malt (YM), Bushnell Haas (BH), Mineral Salt Medium (MSM1), dan Minimum Salt Medium (MSM2), dengan sumber karbon berupa crude oil fraksi sedang atau plastik HDPE. Berbagai peralatan laboratorium umum dan khusus, seperti spektrofotometer UV-Vis, inkubator shaker, sentrifugasi, autoclave, FTIR, SEM, dan UPLC-MS, akan digunakan. Metode kerja meliputi beberapa tahapan utama: 1. **Uji Skrining Medium Biosurfaktan:** Mengevaluasi medium BH, MSM1, dan MSM2 dengan crude oil untuk produksi biosurfaktan, diukur menggunakan Oil Spreading Test (OST) dan Indeks Emulsifikasi (EI24). 2. **Uji Kualitatif Enzim Pendegradasi:** Mendeteksi keberadaan enzim laccase, lignin peroksidase, dan lipase yang dihasilkan khamir menggunakan medium spesifik dengan indikator. 3. **Kurva Pertumbuhan:** Mengamati pola pertumbuhan khamir pada medium MSM2 dengan crude oil sebagai sumber karbon selama 54 jam. 4. **Uji Biodegradasi Plastik HDPE:** Melakukan uji biodegradasi pada lembaran plastik HDPE yang diinkubasi dengan khamir dalam medium MSM2 selama 10 hari. Pengambilan sampel dilakukan setiap 24 jam untuk mengukur kepadatan sel planktonik, produksi biosurfaktan (OST dan EI24), biomassa biofilm basah, dan berat biosurfaktan kasar hasil ekstraksi. 5. **Karakterisasi Plastik HDPE:** Menganalisis perubahan gugus fungsi plastik menggunakan Fourier Transform Infrared (FTIR) dan morfologi permukaan menggunakan Scanning Electron Microscope (SEM) setelah proses biodegradasi. 6. **Karakterisasi Biosurfaktan:** Menganalisis gugus fungsi biosurfaktan kasar menggunakan FTIR dan melakukan analisis lebih lanjut mengenai komposisi senyawa dengan Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS). Secara keseluruhan, penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi potensi khamir dalam mendegradasi plastik HDPE dan menghasilkan biosurfaktan, serta mengkarakterisasi perubahan yang terjadi pada plastik dan biosurfaktan yang dihasilkan.