Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji potensi hayati fungi sklerotium lokal Indonesia, khususnya *Sclerotium rolfsii* IDN1, dalam menghasilkan senyawa bioaktif. Melalui serangkaian tahapan karakterisasi, identifikasi molekuler, dan evaluasi bioaktivitas, penelitian ini menemukan bahwa *S. rolfsii* IDN1 menghasilkan aglutinin dengan potensi deteksi penyakit berbasis glikan, serta memiliki aktivitas antibakteri terhadap *Bacillus subtilis* dan *Escherichia coli* melalui senyawa ergosterol yang diisolasi dari miselium. Temuan ini mengindikasikan fungi sklerotium sebagai sumber potensial senyawa bioaktif untuk aplikasi kesehatan dan bioteknologi, membuka peluang untuk penelitian lebih lanjut mengenai diferensiasi sklerotium dan asal usul senyawa bioaktif tersebut.