Tesis Aghitsni Tediana Aghnisnenda bertujuan untuk mengoptimalkan produksi eksopolisakarida (EPS) dari bakteri *Azotobacter chroococcum* menggunakan pendekatan Response Surface Methodology (RSM) dan mengkarakterisasi potensi fungsionalnya. Penelitian ini mengeksplorasi pemanfaatan molase sebagai alternatif media yang lebih ekonomis. Melalui RSM, kondisi optimal fermentasi didapatkan pada rasio C/N 21, pH 8, dan konsentrasi inokulum 5, menghasilkan EPS dengan yield 0.89 g/L dan konsentrasi 99.28 mg/L. Karakterisasi menunjukkan bahwa EPS ini adalah heteropolisakarida dengan aktivitas antioksidan dan antibakteri terhadap *E. coli* dan *B. subtilis*, yang berpotensi dimanfaatkan sebagai bahan tambahan bioaktif dalam industri pangan, kosmetik, dan kesehatan.