Penelitian ini mengkaji karakterisasi dan penyisihan pewarna sintetis Reactive Black 5 (RB5) dan Reactive Red 2 (RR2) oleh jamur *Aspergillus niger*. **Karakterisasi Pewarna:** * RB5 dan RR2 dikarakterisasi menggunakan spektrofotometer (panjang gelombang maksimum 600 nm dan 525 nm, berturut-turut) dan FTIR. * RB5 memiliki rumus kimia C26H21N5Na4O19S6, berat molekul 991.8 g/mol, gugus azo, dan turunan antrakuinon. FTIR menunjukkan gugus hidroksil, amina, sulfonat, dan cincin aromatik. * RR2 memiliki rumus kimia C19H10Cl2N6Na2O7S2, berat molekul 615.33 g/mol, gugus azobenzene, dan napthalen-1-ylamino. FTIR menunjukkan gugus hidroksil, amina, azo, cincin aromatik, dan alifatik klorin. * Kedua pewarna memiliki struktur kompleks berdasarkan banyaknya puncak gelombang pada FTIR. **Karakterisasi Medium Pertumbuhan (PDB):** * Medium Potato Dextrose Broth (PDB) mengandung dextrose (C6H14O7) dan potato infusion. * Dextrose sumber nutrisi dan pengontrol tekanan osmotik. Potato infusion mengandung ekstrak kentang, daging, peptone, dan mikronutrien. * Kandungan ekstrak kentang: karbohidrat, protein, lemak, vitamin, kalium, besi, kalsium, natrium, dan fosfor. * Analisis FTIR PDB menunjukkan gugus hidroksil, ikatan C-H, aromatik C=C, C-O, dan amina sekunder. * COD medium PDB sebesar 22.200 ppm menunjukkan kandungan organik tinggi. * Sterilisasi PDB dengan autoklaf penting untuk menghindari kontaminasi. * Fermentasi batch dengan *shakeflask* aerobik digunakan untuk homogenisasi substrat, menghindari kontaminasi, dan mempercepat pertumbuhan. * Selama fermentasi, dihasilkan 2-methylbutanal dan 3-methylbutanal dari pemutusan senyawa dextrose. **Analisis Penyisihan Pewarna:** * Penyisihan dilakukan dengan variasi konsentrasi awal pewarna (25, 50, 100, 200 ppm) dan kecepatan putaran shaker (50, 100, 150, 200, 250 rpm). * Suhu dan pH optimum dijaga pada 30°C dan 5. * Penyisihan RB5 dan RR2 mencapai efisiensi tinggi (>96%) pada semua konsentrasi setelah 6 hari. * Konsentrasi awal yang tinggi dapat menyebabkan saturasi permukaan sel jamur. * *Aspergillus niger* mampu menyisihkan pewarna hingga konsentrasi 200 ppm. * Kecepatan putaran 100 rpm dan 150 rpm memberikan kondisi optimum penyisihan untuk RB5 dan RR2. * Kecepatan putaran terlalu tinggi (200, 250 rpm) menurunkan efisiensi penyisihan karena kompetisi oksigen. * Penyisihan warna berkorelasi dengan penurunan Chemical Oxygen Demand (COD). **Pertumbuhan dan Morfologi Jamur:** * *Aspergillus niger* memanfaatkan substrat PDB dan pewarna sintetis untuk pertumbuhan. * Biomassa pelet berperan sebagai bioadsorbate. * Biosorpsi melibatkan interaksi antara pewarna dengan dinding sel biomassa. * Grafik kurva tumbuh menunjukkan fase eksponensial yang berbeda untuk setiap variasi kecepatan putaran. * Laju pertumbuhan spesifik lebih tinggi pada medium kontrol dibandingkan medium dengan pewarna. * SEM menunjukkan perubahan filamen hifa pada biomassa yang terpapar pewarna. * Keberadaan oksigen mempengaruhi pertumbuhan miselia. Konsentrasi oksigen tertinggi ada pada putaran 250 rpm. * pH sistem menurun selama proses penyisihan. * Kondisi pH asam dapat meningkatkan proses dekolorisasi. **Analisis Aktivitas Enzim:** * Enzim yang diuji: lakase, lignin peroksidase (LiP), dan mangan peroksidase (MnP). * Variasi putaran 100 rpm menunjukkan aktivitas enzim oksidase yang paling optimum. * Aktivitas enzim lakase mencapai maksimum pada hari ke-3 dan ke-4. * LiP dan MnP terdeteksi pada hari ke-2 dan mencapai maksimum pada hari ke-3 dan ke-4. * Enzim-enzim ini merupakan enzim ekstraseluler yang terinduksi oleh substrat. * Aktivitas enzim berkorelasi dengan konsentrasi protein. * Enzim MnP memiliki aktivitas tertinggi di kedua pewarna. * Penyisihan warna optimum diperoleh pada kecepatan putaran 150 rpm dan 100 rpm. **Analisis Profil Ikatan (FTIR) Setelah Penyisihan:** * Beberapa puncak gelombang hilang dari FTIR pewarna awal, terutama pada rentang 1500-500 cm-1. * Ikatan azo terbuka tidak terdeteksi. * FTIR menunjukkan gugus fungsi produk degradasi (tersier fenol, ester, asam asetat, alkohol, dll.). * Analisis GCMS menunjukkan keberadaan senyawa toluene dan propanoic acid. * Kemungkinan jalur biodegradasi melibatkan pemutusan ikatan azo, deaminasi, dan hidroksilasi. **Analisis Toksisitas:** * Pewarna sintetis bersifat toksik. * Uji toksisitas menggunakan Bacillus sp. menunjukkan zona inhibisi yang lebih kecil setelah perlakuan penyisihan. * Senyawa hasil degradasi kurang toksik daripada senyawa awal. **Analisis Kinetika:** * Model orde nol cocok untuk kinetika penyisihan warna. * Laju reaksi terbesar diperoleh pada konsentrasi awal 200 ppm. * Reaksi orde nol mengindikasikan bahwa filamen jamur tidak memanfaatkan pewarna sebagai sumber energi utama. * Penyisihan warna melibatkan reaksi enzim yang diinduksi oleh oksigen dan substrat spesifik (cometabolisme). * Kinetika yang terjadi bisa juga merupakan reaksi pseudozero order.