PUTRI KARIMA BESTARI PENENTUAN PARAMETER RENTANG, BATAS KUANTIFIKASI, DAN BATAS DETEKSI UJI NETRALISASI SARS -COV-2 BERBASIS PSEUDOLENTIVIRUS PROGRAM STUDI SAINS DAN TEKNOLOGI FARMASI SEKOLAH FARMASI INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG 2024/2025 Koleksi digital milik UPT Perpustakaan ITB : Hanya dipergunakan di area kampus ITB untuk keperluan pendidikan dan penelitian Koleksi digital milik UPT Perpustakaan ITB : Hanya dipergunakan di area kampus ITB untuk keperluan pendidikan dan penelitian i ABSTRAK Pengujian efikasi vaksin COVID-19 dapat dilakukan menggunakan uji netralisasi virus. Pengujian ini membutuhkan fasilitas penanganan BSL-3 karena virus wild-type SARS-CoV-2 sangat infeksius dan berbahaya. Melalui pseudotyping, virus yang terbentuk tidak memiliki kemampuan untuk melakukan replikasi sehingga pengujian netralisasi dapat dilakukan pada fasilitas penanganan BSL- 2. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan parameter rentang, batas kuantifikasi, dan batas deteksi dari uji netralisasi berbasis pseudolentivirus. Pseudolentivirus dibentuk dari vektor lentivirus dengan permukaan protein spike wild-type SARS-CoV-2. Pembuatan uji ini dimulai dari isolasi dan konfirmasi plasmid untuk produksi pseudolentivirus dan antibodi netralisasi (NAb). Plasmid untuk produksi pseudolentivirus yang telah terkonfirmasi ditransfeksi ke sel HEK293T. Pseudolentivirus yang terbentuk menginfeksi sel HEK293T-ACE2 dan menghasilkan luminesens. NAb juga diproduksi dengan ko-transfeksi plasmid yang telah terkonfirmasi ke dalam sel HEK293T dan hasil ELISA indirect menunjukkan titer NAb sebesar 36,14 ± 1,16 ng/µL. Rentang dari uji netralisasi SARS-CoV-2 berbasis pseudolentivirus adalah sebesar 450-1800 ng. Pengujian uji netralisasi memiliki batas kuantifikasi sebesar 450 ng dan batas deteksi sebesar 257,77 ng. Kata kunci: pseudolentivirus, protein spike, SARS-CoV-2, antibodi netralisasi, uji netralisasi. Koleksi digital milik UPT Perpustakaan ITB : Hanya dipergunakan di area kampus ITB untuk keperluan pendidikan dan penelitian ii ABSTRACT The efficacy testing of the COVID-19 vaccine can be conducted using a virus neutralization assay. This test requires BSL-3 handling facilities because the wild-type SARS-CoV-2 virus is highly infectious and dangerous. Through pseudotyping, the formed virus cannot replicate, allowing neutralization tests to be conducted in BSL-2 handling facilities. This study aims to determine the range, limit of quantification, and limit of detection parameters for the pseudolentivirus-based neutralization assay. Pseudolentivirus was formed from a lentivirus vector with the surface spike protein of wild-type SARS-CoV-2. The assay development started with isolating and confirming plasmids for pseudolentivirus and neutralizing antibodies (NAb) production. Confirmed plasmids for pseudolentivirus production are transfected into HEK293T cells. The formed pseudolentivirus infects HEK293T-ACE2 cells and produces luminescence.