Hasil Ringkasan
ADINDA MUTIARA STUDIIN VITROPENGARUH NANOPARTIKEL KITOSAN MENGANDUNG EKSTRAK PHYLLANTHUS NIRURI TERHADAP EKSPRESI GENCLDN3PADA LINI SEL TM4 PROGRAM STUDI SAINS DAN TEKNOLOGI FARMASI SEKOLAH FARMASI INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG 2023 ABSTRAK Salah satu penerapan sistem nano dalam bidang farmasi ialah menggunakan ekstrakPhyllanthus niruri(P. niruri)sebagai ko-adjuvan yang diformulasikan dalam sistem pembawaŶĂŶŽƉĂƌƟŬĞů ŬŝƚŽƐĂŶ ƵŶƚƵŬ ĚŝŐƵŶĂŬĂŶ ƐĞďĂŐĂŝ ŝŵƵŶŽƐƟŵƵůĂŶ ƐĞĐĂƌĂ ŽƌĂů͘ dĞƌůĞƉĂƐ ĚĂƌŝ ŵĞŶũĂŶũŝŬĂŶŶLJĂ ŝŶŽǀĂƐŝ ƚĞƌƐĞďƵƚ Ěŝ ďŝĚĂŶŐ ĨĂƌŵĂƐŝ͕ ƚĞƌĚĂƉĂƚ ƚŽŬƐŝƐŝƚĂƐ LJĂŶŐ ƟŵďƵů LJĂŶŐ ƚĞůĂŚ ĚŝƚĞůŝƟ ƐĞďĞůƵŵŶLJĂ͘ ^ĞďĞůƵŵŶLJĂ͕ ĚŝŬĞƚĂŚƵŝ ďĂŚǁĂ ŶĂŶŽƉĂƌƟŬĞů ŬŝƚŽƐĂŶ ŵĞŶŐĂŶdung ekstrakP. niruritelah diuji secara in vivodanin vitrobahwa formulasi tersebut bersifat toksik terhadap proses spermatogenesis yang ďĞƌƉŽƚĞŶƐŝ ŝŶĨĞƌƟůŝƚĂƐ ƉĂĚĂ ƉƌŝĂ͘ ^ƚƵĚŝ ŶĂŶŽƚŽŬƐŝŬŽůŽŐŝ ŵĂƐŝŚ ƐĞĚŝŬŝƚ ƵŶƚƵŬ ĚŝƚĞůŝƟ͘ WĞŶĞůŝƟĂŶ ŝŶŝ ďĞƌƚƵũƵĂŶ ƵŶƚƵŬ ŵĞŶŐƵũŝ ƉĞŶŐĂƌƵŚ ŶĂŶŽƉĂƌƟŬĞů ŬŝƚŽƐĂŶ ŵĞŶŐĂŶĚƵŶŐ ĞŬƐƚƌĂŬ P. niruri(NP PN), ŶĂŶŽƉĂƌƟŬĞů ŬŝƚŽƐĂŶ ŬŽƐŽŶŐ ;EW <Ϳ͕ ĚĂŶ ĞŬƐƚƌĂŬ P. niruri(E PN) terhadap ekspresi genCldn3dan Stra8͘ WĞŶĞůŝƟĂŶ ĚŝĂǁĂůŝ ĚĞŶŐĂŶ ĨŽƌŵƵůĂƐŝ EW WE ĚĂŶ EW <͕ ĚŝŬĂƌĂŬƚĞƌŝƐĂƐŝ͕ ĚĂŶ ĚŝƵũŝ ĂŶĂůŝƐŝƐ ĞŬƐƉƌĞƐŝ genCldn3danStra8dari sel TM4 dengan pengujian qPCR. Hasil karakterisasi NP PN, yaitu ukuran ƉĂƌƟŬĞů͕ ŝŶĚĞŬƐ ƉŽůŝĚŝƐƉĞƌƐŝƚĂƐ͕ ĚĂŶ njĞƚĂ ƉŽƚĞŶƐŝĂů ƐĞĐĂƌĂ ďĞƌƚƵƌƵƚ ĂĚĂůĂŚ ϭϱϱ͕ϴϳ Ŷŵ͖ Ϭ͕ϯϬ͖ нϯϮ͕ϱϰ mV. Sedangkan pada NP Ksecara berturut adalah 163,97 nm; 0,26; +30,54 mV dengan efisiensi ƉĞŶũĞƌĂƚĂŶ ϴϳ͕ϴϯй ŵĞŵĞŶƵŚŝ ŬƌŝƚĞƌŝĂ ŽƉƟŵĂů ƵŶƚƵŬ ĚĂƉĂƚ ĚŝŚĂŶƚĂƌŬĂŶ ŬĞ ĚĂůĂŵ ƚƵďƵŚ͘ ŶĂůŝƐŝƐ ŬƵĂůŝƚĂƐ ƉƌŝŵĞƌ ŵĞůŝƉƵƟ Ƶũŝ ƉĞŶĚĂŚƵůƵĂŶ͕ Ƶũŝ ƐƉĞƐŝĮƐŝƚĂƐ͕ ĚĂŶ Ƶũŝ ĞĮƐŝĞŶƐŝ ƉƌŝŵĞƌ ŵĞŶƵŶũƵŬŬĂn hasil ŽƉƟŵĂů ƉĂĚĂ ŐĞŶ ƚĂƌŐĞƚ Cldn3dan gen acuanGapdh(2) untuk dilakukan analisis ekspresi gen pada suhuannealing60°C. Gen targetStra8ƟĚĂŬ ĚĂƉĂƚ ĚŝůĂŬƵŬĂŶ ĂŶĂůŝƐŝƐ ĞŬƐƉƌĞƐŝ ŐĞŶ ŬĂƌĞŶĂ ƉƌŝŵĞƌ ĚĂƌŝ Stra8ďĞƌƐŝĨĂƚ ƟĚĂŬ ƐƉĞƐŝĮŬ ĚĂŶ ƟĚĂŬ ŵĞŵŝůŝŬŝ ĞĮƐŝĞŶƐŝ ƉƌŝŵĞƌ LJĂŶŐ ŽƉƟŵĂů͘ ĞƌĚĂƐĂƌŬĂŶ ŚĂƐŝů analisis ekspresi genCldn3͕ ĚŝĚĂƉĂƚ ŚĂƐŝů ďĂŚǁĂ ƉĞŵďĞƌŝĂŶ EW < ƟĚĂŬ ŵĞŶŐŝŶŚŝďŝƐŝ ĞŬƐƉƌĞƐŝ ŐĞŶ secara signifikan, namun NP PN konsentrasi 62,5 hingga 2000 ppm dan E PN konsentrasi 31,25; 125; 500 ppm dapat menginhibisi ekspresi gen secara signifikan (P<0,05). Sehingga, dapat disimpulkan ďĂŚǁĂ EW WE ĚĂŶ E WE ƚĂŶƉĂ ĚŝĞŶŬĂƉƐƵůĂƐŝŬĂŶ ĚĂůĂŵ ŶĂŶŽƉĂƌƟŬĞů ŬŝƚŽƐĂŶ ďĞƌĞƐŝŬŽ ŵĞŶŐŐĂŶŐŐƵ ƉƌŽƐĞƐ ƐƉĞƌŵĂƚŽŐĞŶĞƐŝƐ ĚĂŶ ďĞƌƉŽƚĞŶƐŝ ŝŶĨĞƌƟůŝƚĂƐ ƉĂĚĂ ƉƌŝĂ͘ Kata kunci: Sel Sertoli/TM4,Cldn3,Stra8͕ ŶĂŶŽƉĂƌƟŬĞů ŬŝƚŽƐĂŶ͕ Phyllanthus niruri, qPCR ABSTRACT dŚĞ ĂƉƉůŝĐĂƟŽŶ ŽĨ ŶĂŶŽ-ƐLJƐƚĞŵƐ ŝŶ ƚŚĞ ƉŚĂƌŵĂĐĞƵƟĐĂů ŝƐ ƵƐŝŶŐ Phyllanthus niruri(P. niruri)extract as a co-ĂĚũƵǀĂŶƚ ůŽĂĚĞĚ ŝŶ Ă ĐŚŝƚŽƐĂŶ ŶĂŶŽƉĂƌƟĐůĞ ĐĂƌƌŝĞƌ ƐLJƐƚĞŵ ĨŽƌ ƵƐĞ ĂƐ ĂŶ ŽƌĂů ŝŵŵƵŶŽƐƟŵƵůĂŶƚ͘ ĞƐƉŝƚĞ ƚŚĞ ƉƌŽŵŝƐŝŶŐ ŝŶŶŽǀĂƟŽŶƐ ŝŶ ƚŚĞ ƉŚĂƌŵĂĐĞƵƟĐĂů ĮĞůĚ͕ ƚŚĞƌĞ ĂƌĞ ĞŵĞƌŐŝŶŐ ƚŽdžŝĐŝƟĞƐ ƚŚĂƚ ŚĂǀĞ ďĞĞŶ ƐƚƵĚŝĞĚ ďĞĨŽƌĞ͘ WƌĞǀŝŽƵƐůLJ ŝƚ ǁĂƐ ŬŶŽwn that chitosan ŶĂŶŽƉĂƌƟĐůĞƐ ĐŽŶƚĂŝŶŝŶŐ P. niruriextract had been testedin vivoandin vitroƚŚĂƚ ƚŚĞ ĨŽƌŵƵůĂƟŽŶ ǁĂƐ ƚŽdžŝĐ ƚŽ ƚŚĞ ƉƌŽĐĞƐƐ ŽĨ ƐƉĞƌŵĂƚŽŐĞŶĞƐŝƐ ǁŚŝĐŚ ŚĂƐ ƚŚĞ ƉŽƚĞŶƟĂů ĨŽƌ ŝŶĨĞƌƟůŝƚLJ ŝŶ ŵĞŶ͘ Nanotoxicology studies are rarely studied. This study aims to examine the effect of P. niruri ĞdžƚƌĂĐƚůŽĂĚĞĚ ĐŚŝƚŽƐĂŶ ŶĂŶŽƉĂƌƟĐůĞƐ ;EW WEͿ͕ ďůĂŶŬ ĐŚŝƚŽƐĂŶ ŶĂŶŽƉĂƌƟĐůĞƐ ;< EWͿ͕ ĂŶĚ P. niruri extract (E PN) on the expression ofCldn3andStra8genes. The study began with NP PN and NP K ĨŽƌŵƵůĂƟŽŶƐ͕ ĐŚĂƌĂĐƚĞƌŝnjĞĚ͕ ĂŶĚ ƚĞƐƚĞĚ ĨŽƌ ĂŶĂůLJƐŝƐ ŽĨ ůĚŶϯ ĂŶĚ ^ƚƌĂϴ ŐĞŶĞ ĞdžƉƌĞƐƐŝŽŶ ĨƌŽŵ dDϰ ĐĞůůƐ ďLJ ƋWZ͘ dŚĞ ƌĞƐƵůƚƐ ŽĨ ƚŚĞ ĐŚĂƌĂĐƚĞƌŝnjĂƟŽŶ ŽĨ WE EWƐ͕ ĂƐ ƉĂƌƟĐůĞ ƐŝnjĞ͕ ƉŽůLJĚŝƐƉĞƌƐŝƚLJ ŝŶĚĞdž͕ and zeta poteŶƟĂů ǁĞƌĞ ƌĞƐƉĞĐƟǀĞůLJ ϭϱϱ͘ϴϳ Ŷŵ͖ Ϭ͘ϯϬ͖ нϯϮ͘ϱϰ ŵs͘ DĞĂŶǁŚŝůe, the NP K is 163.97 Ŷŵ͖ Ϭ͘Ϯϲ͖ нϯϬ͘ϱϰ ŵs ǁŝƚŚ ĞŶƚƌĂƉŵĞŶƚ ĞĸĞŶĐLJ ŝƐ ϴϳ͕ϴϯй ŵĞĞƚƐ ƚŚĞ ŽƉƟŵĂů ĐƌŝƚĞƌŝĂ ƚŽ ďĞ ĚĞůŝǀĞƌĞĚ into the body. Primary quality analysis including preliminary test, primer specificity, and primary ĞĸĐŝĞŶĐLJ ƚĞƐƚ ƐŚŽǁĞĚ ŽƉƟŵĂů ƌĞƐƵůts forCldn3as target gene andGapdh(2) as housekeeping gene for gene expression analysis at 60°C annealing temperature.Stra8could not be analyzed for gene expression because the primers were non-ƐƉĞĐŝĮĐ ĂŶĚ ĚŝĚ ŶŽƚ ŚĂǀĞ ŽƉƟŵĂů ƉƌŝŵĞƌ ĞĸĐŝĞŶĐLJ͘ ĂƐĞd on the results of analysis ofCldn3ŐĞŶĞ ĞdžƉƌĞƐƐŝŽŶ͕ ŝƚ ǁĂƐ ĨŽƵŶĚ ƚŚĂƚ ĂĚŵŝŶŝƐƚƌĂƟŽŶ ŽĨ EW < ĚŝĚ ŶŽƚ ƐŝŐŶŝĮĐĂŶƚůLJ ŝŶŚŝďŝƚ ŐĞŶĞ ĞdžƉƌĞƐƐŝŽŶ͕ ďƵƚ WE EW ĐŽŶĐĞŶƚƌĂƟŽŶƐ ŽĨ ϲϮ͘ϱ ƚŽ ϮϬϬϬ ƉƉŵ ĂŶĚ E WE ĐŽŶĐĞŶƚƌĂƟŽŶƐ ŽĨ ϯϭ͕Ϯϱ͖ ϭϮϱ͖ ϮϱϬ ƉƉŵ ƐŝŐŶŝĮĐĂŶƚůLJ ŝŶŚŝďŝƚĞĚ ŐĞŶĞ ĞdžƉƌĞƐƐŝŽŶ ;WфϬ͘ϬϱͿ͘ /ƚ ĐĂŶ ďe ĐŽŶĐůƵĚĞĚ ƚŚĂƚ EW WE ĂŶĚ E WE ǁŝƚŚŽƵƚ ďĞŝŶŐ ĞŶĐĂƉƐƵůĂƚĞĚ ŝŶ ĐŚŝƚŽƐĂŶ ŶĂŶŽƉĂƌƟĐůĞƐ ŚĂǀĞ ƚŚĞ ƌŝƐŬ ŽĨ ŝŶƚĞƌĨĞƌŝŶŐ ǁŝƚŚ ƚŚĞ ƉƌŽĐĞƐƐ ŽĨ ƐƉĞƌŵĂƚŽŐĞŶĞƐŝƐ ĂŶĚ ƉŽƚĞŶƟĂůůLJ ŝŶĨĞƌƟůŝƚLJ ŝŶ ŵĞŶ͘ Keywords: Sertoli cells/TM4,Cldn3,Stra8͕ ĐŚŝƚŽƐĂŶ ŶĂŶŽƉĂƌƟĐůĞƐ͕ Phyllanthus niruri, qPCR i.