Path: Top » S2-Theses » Chemistry » 1992
ANALISA T4 SECARA RADIOIMUNOASSAY DENGAN MENGGUNAKAN ANTIBODI AMOBIL
Oleh : Dian Pertiwi, S2 - Chemistry
Dibuat : 1992-02-28, dengan 7 file
Keyword : Radioimunoassay, thyroid function, solid phase, polyethylene glycol.
Kepala Subjek : Chemistry
Nomor Panggil (DDC) : T 616.075 7 PER
Abstrak :
Radioimunoassay (RIA) merupakan suatu teknik analisa yang balk untuk diagnoses fungsi tiroid. Teknik RIA yang telah digunakan secara rutin adalah RIA yang menggunakan metoda pemisahan fasa cair, misalnya pengendapan dengan polietilen glikol. Dewasa ini perhatian telah diarahkan pada teknik RIA fasa padat.
Pada penelitian ini dilakukan teknik RIA fasa padat dengan mengikatkan antibodi secara kimia pada dinding tabung plastik sebelah dalam yang sebelumnya telah dilapisi glutaraldehid. Antibodi yang akan ditempelkan terlebih dahulu dimurnikan secara kromatografi afinitas yang menggunakan protein A sepharosa sebagai kolom. Selanjutnya ditentukan kadar antibodi yang akan ditempelkan dengan melakukan titer antibodi secara fasa padat.
Dilakukan kontrol untuk setiap parameter parcobaan untuk mendapatkan hasil analisa yang optimal. Disain assay (penentuan) dilakukan terhadap volume larutan baku, waktu dan temperatur inkubasi untuk mengetahui kepekaan dan untuk mendapatkan daerah kerja yang diinginkan.
Dari data yang diperoleh ternyata dengan menambahkan 20 ul larutan baku T4/cuplikan, 300 ul T4 bertanda 1251 pada tabung yang telah dilapisi dengan antibodi dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 25 C memberikan hasil yang cukup balk pada daerah kerja 14 - 780 nmol/l. Penentuan besaran karakteristik yang dilakukan adalah : besar ikatan non spesif1k (N5B), besar ikatan maksimum (% Bo/T), konsentrasi pada 50 % B/Bo, harga cuplikan kontrol, koefisien variansi antar penentuan cuplikan kontrol dan uji kestabilan.
Abstract :
Radioimmunoassay (RIA) has become a good analytical technique for the diagnosis of thyroid function. The routine used of RIA technique is the liquid phase radioimnunoassay as separating methode, such as precipitation by polyethylene glycol. At present, the attention has been directed towards the solid phase radioimmunoassay technique.
In the present study, the solid phase radioimmunoassay technique has been done by binding an antibody at the inner wall of the plastic tubes in which has been pre-coated with glutaraldehide. The antibody to be coated must be purified by affinity chromatography using protein A-sepharose as a colomn. Futher on, the titer of antibody has been determined by solid phase technique. Control has been conducted to each experimental parameter for obtaining optimal analytical results. The assay design is set up to the volume of standard solution, time and temperature of incubation to identify a sensitivity and to find the working range needed.
From the data obtained, it is proved that by adding 20 ul T4 standard solution, 300 ul T4 - 125I in a glutaraldehide-coated tube and to be incubated for 24 hours at 25 C provides sufficient results in the working range of 14 - 780 nmol/l. The determination of characteristic undertaken are non specific binding (N5B), maximum binding (% Bo/T), concentration value at 50/ B/Bo, the value of control samples, coefficient of variance between assay of control samples and stability test.
Copyrights : Copyright (c) 1991 by Faculty Mathematics and Natural Sciences. Information Dissemination Right @2008 ITB Central Library, Jl. Ganesha 10 Bandung,40132, Indonesia. Verbatim copying and distribution of this entire article is permitted by author to ITB Central Library in any medium, provided this notice is preserved.
Beri Komentar ?#(0) | Bookmark
| Properti | Nilai Properti |
|---|---|
| ID Publisher | JBPTITBPP |
| Organisasi | S2 - Chemistry |
| Nama Kontak | Drs. Mahmudin, SIP. |
| Alamat | Jl. Ganesha 10 |
| Kota | Bandung |
| Daerah | Jawa Barat |
| Negara | Indonesia |
| Telepon | 62-22-2509118, 2500089 |
| Fax | 62-22-2500089 |
| E-mail Administrator | digilib@lib.itb.ac.id |
| E-mail CKO | digilib@lib.itb.ac.id |