Path: Top S1-Final Project Chemistry 2012

KRISTALISASI ENZIM β-AMILASE DARI UBI CILEMBU (Ipomoea batatas cv. Cilembu)

CRYSTALLIZATION OF β-AMILASE ENZYME FROM CILEMBU SWEET POTATOES (Ipomoea batatas cv. Cilembu)

Undergraduate Theses from JBPTITBPP / 2014-03-11 11:02:56
Oleh : CITRA AMELIA HANDAYANI (NIM : 10508059); Pembimbing I : Dr. Fida Madayanti W Pembimbing II : Dr. Ihsanawati, S1 - Department of Chemistry
Dibuat : 2012, dengan 7 file

Keyword : Ubi Cilembu, β-amilase, eksoamilase, kristalisasi protein.

β-amilase merupakan enzim exoamilase yang menghidrolisis ikatan α-1,4-glikosidik pada polisakarida menghasilkan unit maltosa dari ujung non pereduksi. Sirup maltosa mengandung kadar maltosa tinggi dan semakin popular dikonsumsi oleh penderita diabetes. Untuk kajian scientific, pemurnian dan kristalisasi enzim β-amilase menjadi semakin penting karena aplikasi β-amilase yang berkembang, terutama untuk memproduksi sirup maltosa dari pati. Salah satu sumber enzim β-amilase adalah ubi Cilembu. Tujuan penelitian ini adalah melakukan pemurnian dan kristalisasi enzim β-amilase dari ubi Cilembu. Tahapan pemurnian meliputi isolasi ekstrak kasar enzim, penambahan substrat berlebih dengan konsentrasi 1500 mg/mL, fraksinasi ammonium sulfat dan kromatografi penukar ion DEAE-Sephacel. Kemurnian enzim β-amilase hasil kromatografi penukar ion DEAE-Sephacel mengalami peningkatan 28x lebih besar untuk F0−60% dan 82x lebih besar untuk F60−80% dibandingkan ekstrak enzimnya. Berdasarkan hasil identifikasi menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT), diperoleh bahwa produk reaksi hidrolisis enzim adalah maltosa. Hasil elektroforesis gel poliakrilamid diperoleh bahwa pita tunggal β-amilase berukuran 256 kDa (Native-Page) dan 64 kDa (SDS-Page). Hal tersebut menunjukkan bahwa enzim β-amilase yang telah dimurnikan merupakan enzim homotetramer. β-amilase murni yang telah dikristalkan menggunakan crystallization kit komersial telah menampakkan titik-titik kristal.

Deskripsi Alternatif :

β-amylase is an exoamylase enzyme which hydrolyzes α-1,4-glycosidic bonds at non-reducing end of polysaccharide, producing maltose units. Maltose syrup contains high concentration of maltose and becomes more popular nowadays as a diabetic diet. Protein structural study through purification and crystallization of β-amylase plays an important role in developing β-amylase applications, such as making maltose syrup from starch. One of the β-amylase sources is Cilembu sweet potatoes. Objective of this research was purification and crystallization of β-amylase from Cilembu sweet potatoes. In order to obtain the research objective, purification was carried out with several steps, isolation of crude enzyme extract, addition of excess substrate (1500 mg/mL), fractionation by ammonium sulphate, and ion exchange chromatography DEAE-Sephacel. The purity of β-amylase increased 28 and 82 times for F0−60% and F60−80%, respectively after the ion exchange chromatography DEAE-Sephacel. Hydrolysis products of enzyme identified by Thin Layer Cromatography (TLC) showed that the main product was maltose. Based on polyacrylamide gel electrophoresis analysis, it obtained a single β-amylase band with size of 256 kDa (native-page) and 64 kDa (SDS-page). This results implied that the β-amylase was an homotetramer enzyme. Pure amylase was then crystallized by commercial kit crystallization and showed some tiny crystals.


Beri Komentar ?#(0) | Bookmark

PropertiNilai Properti
ID PublisherJBPTITBPP
OrganisasiS
Nama KontakUPT Perpustakaan ITB
AlamatJl. Ganesha 10
KotaBandung
DaerahJawa Barat
NegaraIndonesia
Telepon62-22-2509118, 2500089
Fax62-22-2500089
E-mail Administratordigilib@lib.itb.ac.id
E-mail CKOinfo@lib.itb.ac.id

Print ...

Kontributor...

  • Pembimbing I : Dr. Fida Madayanti W

















































































































    Pembimbing II : Dr. Ihsanawati, Editor: Alice Diniarti

Download...